Kalkulator Koncentracji Białka

Kategoria: Biologia
- March 24, 2025
| |
Typowe wartości mieszczą się w zakresie od 0.5 do 2.0
Standardowe kuwety mają długość drogi optycznej 1 cm
Jeśli próbka została rozcieńczona przed pomiarem (np. 5 = rozcieńczenie 1:5)

Stężenie białka przy użyciu absorbancji przy 280 nm (A280) określa się za pomocą prawa Beera-Lamberta:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

gdzie:

  • \( C \) = Stężenie białka (mg/mL)
  • \( A \) = Absorbancja przy 280 nm
  • \( \epsilon \) = Współczynnik ekstynkcji (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Długość drogi optycznej kuwetki (cm)

Co to jest Kalkulator Stężenia Białka?

Kalkulator Stężenia Białka pomaga określić stężenie białka przy użyciu różnych metod, w tym:

  • Absorbancja przy 280 nm (A280): Szybka i nieinwazyjna metoda oparta na aromatycznych aminokwasach.
  • Test Bradforda: Metoda kolorymetryczna wykorzystująca wiązanie barwnika.
  • Test BCA (kwas bicinchonowy): Metoda oparta na redukcji miedzi i detekcji kolorymetrycznej.
  • Test Lowry'ego: Ugruntowane podejście wykorzystujące interakcje białko-miedź.

Jak korzystać z Kalkulatora

Wykonaj te kroki, aby obliczyć stężenie białka:

  • Wybierz metodę pomiaru (A280, Bradford, BCA lub Lowry).
  • Wprowadź wymagane wartości, takie jak absorbancja, współczynnik rozcieńczenia i współczynnik ekstynkcji (jeśli to konieczne).
  • Jeśli korzystasz z metody krzywej standardowej (Bradford, BCA lub Lowry), wprowadź parametry krzywej.
  • Kliknij przycisk "Oblicz", aby uzyskać wynik stężenia.

Zalety korzystania z Kalkulatora

  • Os saves time by automating concentration calculations.
  • Obsługuje wiele metod pomiaru dla elastyczności.
  • Zawiera kalkulator rozcieńczeń do przygotowywania określonych stężeń.
  • Redukuje błąd ludzki w obliczeniach ręcznych.

Najczęściej zadawane pytania

1. Jak dokładna jest metoda Absorbancji (A280)?

Metoda A280 jest zazwyczaj dokładna dla czystych białek, ale może być wpływana przez zanieczyszczenia, takie jak kwasy nukleinowe.

2. Czy mogę użyć testu Bradforda dla wszystkich białek?

Test Bradforda działa dobrze dla większości białek, ale może dawać zmienne wyniki w zależności od składu białka.

3. Jaka jest zaleta testu BCA?

Metoda BCA jest bardziej kompatybilna z detergentami i ma szerszy zakres liniowy niż Bradford.

4. Jak wybrać odpowiedni współczynnik ekstynkcji dla A280?

Użyj opublikowanych wartości dla znanych białek lub oblicz współczynnik ekstynkcji na podstawie składu aminokwasowego.

5. Dlaczego potrzebuję współczynnika rozcieńczenia?

Jeśli próbka jest rozcieńczona przed pomiarem, musisz pomnożyć obliczone stężenie przez współczynnik rozcieńczenia, aby uzyskać poprawne końcowe stężenie.